Aspergillus awamori: PRODUÇÃO DE PROTEASES POR FERMENTAÇÃO EM ESTADO SÓLIDO UTILIZANDO RESÍDUOS AGROINDUSTRIAIS

Abstract

As proteases pertencem a uma classe de enzimas essenciais ao metabolismo de todos os organismos, atuando na degradação de matéria orgânica e na assimilação e reciclagem de nutrientes. Elas representam 60% do mercado enzimático mundial, e são empregadas em diversos setores industriais, como o processamento de couro, tratamento de efluentes, e a produção de detergentes, medicamentos e alimentos. Os fungos filamentosos do gênero Aspergillus são extensivamente estudados devido ao seu alto potencial biotecnológico, pois eles produzem grandes quantidades de enzimas, são capazes de crescer em substratos de baixo custo, e são facilmente manipuláveis em condições de laboratório. O objetivo deste estudo foi investigar a produção de proteases por A. awamori DPUA 1473, utilizando resíduos da agroindústria como substrato. A espécie foi cedida da Coleção de Culturas DPUA/UFAM. Para o experimento, o fungo foi reativado em caldo glicosado 2% (p/v) e autenticado de acordo com as características macro e micro morfológicas da espécie quando cultivada nos meios MEA (ágar, extrato de malte), Czapek-Dox e CYA (ágar Czapek, extrato de levedura 0,5% [p/v]), por 7 dias a 28 ºC. A fermentação em estado sólido foi realizada a partir do inóculo de 15 discos miceliais da cultura com 7 dias cultivada em CYA. O experimento foi conduzido por 6 dias a 28 ºC em recipientes de vidro contendo substrato composto de resíduo triturado e umedecido. Os resíduos escolhidos foram casca de tucumã (CT) e polpa de cará-espinho (CE), suplementados com farelo de arroz na proporção de 9:1. Ao término da fermentação, foi realizada extração aquosa para recuperação do extrato enzimático bruto de cada substrato miceliado. A partir dos extratos enzimáticos, foram realizados ensaios para determinação quantitativa da atividade proteolítica, utilizando como substrato azocaseína 1% (p/v). Os resultados foram obtidos por leitura em espectrofotômetro à 440 nm. Todas as reações e leituras foram realizadas em triplicatas. O extrato que apresentou maior atividade proteolítica foi CT, com 196,24 ± 5,3 U/mL, enquanto CE apresentou 77,7 ± 4,16 U/mL. Os resultados indicam que a linhagem de A. awamori estudada apresenta um potencial na produção de proteases de importância industrial, utilizando resíduos agroindustriais da Amazônia como alternativa viável de substrato.